1. INTRODUÇÃO

O termo intervalo pós-morte (IPM), ou cronotanatognose, refere-se ao estudo do tempo decorrido entre a morte do indivíduo e sua descoberta. A determinação da data da morte é uma tarefa de extrema importância, por possuir implicações jurídicas e criminais significativas, como o pagamento de seguros e a condução de investigações policiais (1).

A determinação do IPM é uma das tarefas mais complexas no âmbito da medicina legal, uma vez que não existe um método único que permita sua definição precisa. Por essa razão, diversos métodos devem ser utilizados de forma concomitante para se estabelecer uma estimativa aproximada. Essa determinação é influenciada tanto por fatores endógenos quanto por fatores exógenos, sendo que condições ambientais, como temperatura, umidade, topografia e o tempo até a descoberta do corpo, impactam significativamente a avaliação da data do óbito (1,2).

Atualmente, não existe um método universalmente válido para todas as situações, ou mesmo para um subconjunto delas. Para estimar o IPM, recomenda-se a aplicação da metodologia mais confiável e adequada às circunstâncias específicas de cada caso. Em alguns contextos, é necessária a exclusão de determinados métodos, enquanto outros se mostram mais apropriados. A associação de múltiplas abordagens é imprescindível para aumentar a precisão da estimativa. Contudo, para que um método seja aplicável, é fundamental que tenha sido apresentado à comunidade científica, possua informações claras sobre sua utilização e demonstre nível satisfatório de exatidão (1).

Diante da necessidade crescente de aumentar-se a precisão da estimativa do intervalo de tempo pós-morte, a ciência tem intensificado esforços no desenvolvimento de novos métodos capazes de superar as limitações das abordagens tradicionais, o que vem impulsionando significativamente as pesquisas na área forense. Nos últimos anos, observa-se um foco cada vez maior em métodos quantitativos baseados não apenas em observações empíricas, mas também em critérios físicos e matemáticos que buscam estimar o tempo de morte com maior precisão. Nesse contexto, espera-se que o avanço tecnológico e o aprimoramento de ferramentas analíticas cada vez mais sensíveis promovam inovações relevantes nesse campo de estudo (1–3).

Diante desse cenário, torna-se essencial reunir e analisar criticamente as evidências disponíveis sobre os métodos empregados na estimativa do IPM, comparando abordagens tradicionais e modernas quanto à sua aplicabilidade e acurácia. Assim, este trabalho propõe-se a realizar uma revisão sistemática da literatura, a fim de sintetizar os principais avanços científicos e contribuir para o aprimoramento das práticas médico-legais relacionadas à determinação do intervalo pós-morte.

2. MATERIAL E MÉTODO

A busca por estudos foi realizada na base de dados PubMed, no dia 11 de maio de 2025, com o objetivo de identificar publicações que abordassem métodos tradicionais e/ou modernos de estimativa do intervalo pós-morte (IPM) em seres humanos.

A revisão sistemática foi desenvolvida de acordo com as recomendações do sistema Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-Analyses (PRISMA) (4).

A estratégia de busca foi construída utilizando descritores controlados e termos livres combinados por operadores booleanos, conforme apresentado a seguir: ((“Time of Death”[MeSH Terms] OR “Postmortem Interval”[Title/Abstract] OR “Post-mortem Interval”[Title/Abstract] OR “PMI”[Title/Abstract] OR “Postmortem Changes”[MeSH Terms]) AND (“Methods”[MeSH Terms] OR “Estimation”[Title/Abstract] OR “Techniques”[Title/Abstract] OR “Approaches”[Title/Abstract]) AND (“Forensic Medicine”[MeSH Terms] OR “Forensic Pathology”[Title/Abstract] OR “Thanatology”[Title/Abstract])).

Foram incluídos apenas artigos com texto completo disponível, publicados entre 2015 e 2025, que abordassem métodos de determinação do intervalo pós-morte (IPM) aplicados a amostras humanas, em qualquer fase do processo de decomposição. Foram excluídos os estudos duplicados, relatos de caso, artigos que não tratassem diretamente da estimativa do intervalo pós-morte, bem como aqueles fora dos idiomas selecionados ou sem acesso gratuito ao texto completo.

Os estudos incluídos foram organizados em uma planilha do Microsoft Excel, contendo informações sobre autoria, título, ano de publicação, amostra, tipo de método (tradicional ou moderno), técnica utilizada, principais resultados, vantagens e limitações.

A análise foi realizada de forma descritiva e qualitativa, permitindo a identificação de tendências, convergências metodológicas e lacunas de conhecimento nos métodos empregados para a estimativa do intervalo pós-morte (IPM) em humanos.

3. RESULTADOS

A busca bibliográfica foi realizada na base de dados PubMed, utilizando combinações de descritores controlados (MeSH Terms) e termos livres relacionados à estimativa do intervalo pós-morte (Postmortem Interval – PMI).

Inicialmente, foram identificados 125 artigos. Após a aplicação do filtro de período de publicação (2015–2025) e disponibilidade gratuita dos textos, 108 registros permaneceram para triagem. Em seguida, procedeu-se à leitura manual de títulos e resumos, resultando na seleção preliminar de 53 estudos potencialmente relevantes para o tema.

Na etapa de elegibilidade, foram excluídos 14 artigos que não estavam disponíveis em português, inglês ou espanhol, totalizando 39 estudos incluídos na amostra final desta revisão sistemática.

O processo de identificação, triagem, elegibilidade e inclusão dos estudos está representado no fluxograma PRISMA.

Os 39 estudos selecionados foram publicados entre 2016 e 2025, com aumento expressivo a partir de 2020. A distribuição temporal evidencia picos de publicações em 2021 (7 estudos) e 2024 (8 estudos), demonstrando o crescente interesse na modernização das técnicas de estimativa do intervalo pós-morte (IPM).

Entre os estudos incluídos, 25 foram classificados como modernos, 7 como tradicionais e 7 como híbridos, conforme o gráfico.

Gráfico 1 – Classificação do método dos estudos selecionados (elaborado pela autora).

A categorização considerou o tipo de abordagem utilizada na estimativa do IPM. A diferença central está na transição de observações macroscópicas e análises físico-químicas simples (tradicionais) para a investigação de alterações biomoleculares e uso de tecnologias avançadas (modernas), que oferecem maior objetividade e potencial para estimativas de IPM de médio a longo prazo.

Foram definidos como métodos tradicionais aqueles baseados em parâmetros físicos, fisiológicos ou bioquímicos simples, como temperatura corporal, rigidez, coloração cutânea, entomologia forense e dosagem de potássio no humor vítreo. Os métodos modernos, por sua vez, englobam técnicas moleculares, químicas e tecnológicas recentes, incluindo proteômica, metabolômica, análises de DNA e RNA, espectroscopia, tomografia pós-morte e modelagens digitais. Por fim, os métodos híbridos reúnem características de ambas as abordagens, combinando técnicas clássicas com ferramentas laboratoriais ou tecnológicas avançadas, com o objetivo de aumentar a precisão da estimativa do tempo de morte.

Tabela 1 – Artigos selecionados e suas principais características (elaborado pela autora).

4. DISCUSSÃO

A análise dos estudos incluídos nesta revisão evidencia uma transição gradual e consistente das abordagens tradicionais para métodos modernos na estimativa do intervalo pós-morte (IPM). Esse avanço reflete uma mudança fundamental na ciência forense, impulsionada pela necessidade de superar as limitações de precisão e objetividade dos métodos tradicionais, especialmente para IPMs mais longos (1,2,5).

4.1.  ABORDAGENS TRADICIONAIS

As abordagens tradicionais para a estimativa do intervalo pós-morte (IPM) formam a base da tanatocronologia e concentram-se, sobretudo, na observação de fenômenos cadavéricos macroscópicos, bem como em análises físico-químicas simples que ocorrem nas fases iniciais do período pós-morte (5). Os estudos nas fontes descrevem essas metodologias, suas aplicações e suas limitações inerentes, que motivaram o desenvolvimento de abordagens modernas.

4.1.1. Métodos baseados em fenômenos cadavéricos precoces

De acordo com Secco et al. (2025), esses são os métodos mais utilizados na rotina forense diária para a estimativa do IPM precoce (5); eles são mais observáveis e previsíveis nas primeiras 72 horas após a morte (6). Eles envolvem a avaliação das alterações observáveis no corpo, como algor mortis, rigor mortis (rigidez cadavérica) e livor mortis (manchas hipostáticas) (5,7). O algor mortis refere-se ao declínio progressivo da temperatura corporal com velocidade variável após a interrupção definitiva das funções vitais por meio da perda de calor contínua do corpo até entrar em equilíbrio com o meio. O rigor mortis corresponde ao estado de rigidez muscular generalizada que surge após um período inicial de flacidez. Esse enrijecimento decorre da indisponibilidade de ATP (adenosina trifosfato) nas fibras musculares, o que leva à fixação permanente das pontes entre actina e miosina. O rigor mortis se inicia algumas horas após a morte (entre 1 e 2 horas), atingindo seu pico após 8 a 12 horas e desaparecendo à medida que a putrefação progride e rompe as estruturas musculares. Já o livor mortis consiste na acumulação passiva de sangue nas regiões declivosas do corpo, resultante da ação da gravidade sobre o sistema circulatório inerte, surgindo em geral a partir de 30 minutos até algumas horas após a morte e se fixando após 8 a 12 horas (8).

Esses métodos, contudo, apresentam limitações significativas, especialmente no que se refere à acurácia, já que são influenciados por múltiplos fatores (gênero, presença de microrganismos, idade, temperatura ambiente, atividade de insetos, causa da morte, composição corporal, umidade), além de dependerem fortemente de avaliações visuais e subjetivas (7, 9).

4.1.2. Método termométrico ou Nomograma de Henssge

Esse método é baseado na diminuição da temperatura central em curva sigmoide durante as primeiras 24 horas pós-morte. Sob condições ideais, pode-se alcançar uma precisão de cerca de 2,8 horas (10). O método depende da documentação correta das temperaturas ambiente e retal (11). Erros nas variáveis, mesmo que pareçam insignificantes, podem levar a estimativas erradas do IPM (12). A estabilidade do ambiente também é crucial. Alterações ambientais como a abertura de uma janela, por exemplo, podem afetar a temperatura ambiente e prejudicar a estimativa baseada no nomograma (11).

 4.1.3. Potássio no humor vítreo

A análise da concentração de potássio no humor vítreo é um método químico que complementa ou auxilia os métodos físicos (5). A janela de tempo em que a estimativa é mais precisa, apresentando a menor margem de erro, é tipicamente nas primeiras 10 a 18 horas pós-morte (6, 13).

O estudo de Foster et al. (2016) teve como objetivo desenvolver uma fórmula de regressão linear para estimar o intervalo pós-morte a partir dos níveis de potássio no humor vítreo, utilizando amostras de vítimas de acidentes rodoviários com tempo de morte previamente conhecido. Os resultados indicaram que o aumento da concentração de potássio apresenta uma relação linear com o IPM, expressa por uma fórmula que mostrou elevado grau de concordância com modelos propostos em pesquisas anteriores. Embora a fórmula gerada seja comparável a resultados de estudos anteriores, os autores alertam que as estimativas de IPM podem exceder um dia em relação ao tempo real, sugerindo que, para maior precisão em investigações médico-legais, biomarcadores mais exatos devem ser considerados (14).

4.1.4. Entomologia forense

A estimativa do intervalo pós-morte também pode ser realizada por meio da entomologia forense, ramo da investigação que se fundamenta na identificação das espécies de insetos e na análise de seus ciclos de vida durante o processo de colonização cadavérica (5,15). É considerada uma das formas mais acuradas de determinar o IPM, sendo rotineiramente utilizada em investigações de morte (16, 17).

Os artigos de Ruiz López e Partido Navadijo (2025) e Gelderman et al. (2018) indicam que este método é útil tanto em casos de IPM curto, considerando o mIPM (mínimo intervalo pós-morte – tempo mínimo desde a colonização da fauna), quanto longo, quando o corpo já se encontra em estado avançado de decomposição (decomposição avançada de tecidos moles, saponificação, mumificação, restos esqueletizados) sendo a observação do tipo e estágio larval particularmente valiosa (1, 6, 17). Contudo, esse método apresenta limitações significativas, sobretudo pela forte influência exercida pela temperatura ambiente sobre o desenvolvimento dos insetos ao longo de seu ciclo de vida, o que dificulta a aquisição de dados realistas para replicação em laboratório (1).

4.1.5. Outros métodos tradicionais

Ainda que bem menos utilizadas, existem também as reações supravitais, que incluem o estudo das reações relacionadas à excitabilidade elétrica ou farmacológica residual dos tecidos corporais (5,11). A janela de tempo ideal para a aplicação destes métodos é limitada a um período de até 13 horas pós-morte (17).

Para estágios mais avançados de decomposição (dias a anos), pode-se utilizar a avaliação do estágio de putrefação (11) e a investigação histológica de diferentes substratos teciduais (5,18). O estudo de Ceciliason et al. (2021) visou quantificar histologicamente fígados humanos decompostos, propondo um sistema de pontuação chamado “score de decomposição hepática” (HDS) para melhorar a estimativa do IPM em conjunto com o score corporal total (TBS) (18).

A técnica do luminol, utilizada como teste indicativo para estimativa do intervalo pós-morte (IPM) em restos esqueléticos, é considerada um método simples, reprodutível e de baixo custo, que atua como complemento às abordagens já existentes. Não há uma janela de tempo ideal definida em horas ou dias específicos para o luminol. O princípio do método reside na degradação da hemoglobina presente nos traços intra-ósseos ao longo do tempo; à medida que o IPM aumenta, a quantidade de hemoglobina diminui, resultando em uma reação de quimioluminescência menos intensa. No entanto, os resultados obtidos com o luminol são influenciados por diversos fatores tafonômicos, como temperatura, umidade, tipo de solo e pH, que podem afetar a reação e confiabilidade da estimativa (19).

O intervalo pós-morte pode ainda ser avaliado com o uso de exames de imagem. Morikawa et al. (2016) avaliaram a densidade do LCR retrospectivamente através do uso de tomografia computadorizada para comparar diferentes intervalos pós-morte, e os resultados indicaram aumento significativo ao longo do tempo, com o terceiro dia representando o ponto mais precoce para detecção de alterações e o sétimo dia exibindo valores estatisticamente superiores. Contudo, estes relatórios cobriram apenas um curto período post-mortem, além de que, devido à ampla sobreposição dos valores de densidade observados entre as amostras, foi concluído que o LCR, isoladamente, não constitui um estimador linear nem confiável do intervalo pós-morte (IPM) (20).

4.2. ABORDAGENS MODERNAS

Para Pittner et al. (2022), as técnicas modernas mostram-se promissoras ao ampliar o espectro metodológico aplicável aos estágios pós-morte em que outros métodos não conseguem fornecer dados confiáveis (21).  Cada vez mais, recomenda-se a adoção de uma abordagem multidisciplinar e a utilização de análises integradas com múltiplos painéis de marcadores, de modo a incorporar variáveis influentes, e assim, aprimorar a precisão e a confiabilidade na estimativa do intervalo pós-morte (2, 5, 16, 19).

4.2.1. Abordagens Moleculares

O interesse predominante se concentra nas tecnologias de alto rendimento, conhecidas como ciências “Omics” (proteômica, metabolômica, lipidômica e transcriptômica) (5).

As abordagens “Omics” proporcionam uma compreensão abrangente das alterações bioquímicas que ocorrem após a morte. Elas se destacam como ferramentas analíticas avançadas e promissoras na estimativa do intervalo pós-morte por oferecerem elevada acurácia, sensibilidade e reprodutibilidade nos resultados (5).

A análise da degradação proteica pós-morte tem despertado grande interesse na área forense. Entre as abordagens disponíveis, a proteômica destaca-se por sua maior confiabilidade em comparação à degradação de DNA e RNA, uma vez que os marcadores proteicos tendem a ser mais estáveis, menos influenciados por fatores extrínsecos e apresentam padrões de degradação mais lentos e reprodutíveis, características que os tornam especialmente adequados para estimativas de intervalo pós-morte de longo prazo, podendo se estender por anos ou até mesmo décadas em ossos ou tecidos mineralizados (5, 21, 22).

Há um foco crescente no uso do RNA, especificamente do microRNA (miRNA), como biomarcador (1,3). Os miRNAs são vistos como potenciais genes de referência devido à sua estabilidade pós-morte e resistência à degradação (2).

A análise de miRNA é tradicionalmente aplicada para estimar intervalos pós-morte iniciais (das primeiras horas até cerca de sete dias) devido ao seu padrão de degradação gradual e relativamente previsível nesse período (5, 7, 16). Contudo, Cianci et al. (2024) sugerem que essa técnica também pode ter utilidade em contextos mais tardios, especialmente quando aplicada a tecidos mais protegidos, alcançando potenciais estimativas que variam de várias semanas (28 a 90 dias, dependendo da matriz biológica) até um ano em matrizes específicas (saliva e sêmen) (16). Já Bianchi et al. (2022), ao analisar DNA da polpa dentária para detectar mutações somáticas decorrentes da necrose pós-morte, reportaram uma capacidade de estimativa de até 34 dias (23).

A estimativa do IPM também pode ser realizada por meio da análise do necrobioma ou tanatomicrobioma. Essa abordagem moderna concentra-se no estudo da sucessão das comunidades microbianas, principalmente bactérias e fungos, que colonizam o corpo após a morte, permitindo identificar padrões temporais associados às diferentes fases da decomposição, refletindo um processo dinâmico e ecológico, sendo especialmente valiosa para estender a avaliação de dias a semanas, período em que os métodos tradicionais se tornam altamente imprecisos ou obsoletos (5,24,25). Os resultados dessas análises indicam que, após a morte, microrganismos (especialmente aqueles provenientes do trato gastrointestinal) passam a proliferar nos órgãos internos. A evolução e sucessão dessas comunidades bacterianas no período pós-morte podem revelar biomarcadores valiosos para a estimativa do IPM, contribuindo para maior precisão na determinação do tempo de óbito (24). A análise do tanatomicrobioma, frequentemente realizada por meio do sequenciamento do gene 16S rRNA, demonstrou em modelos animais que um “relógio microbiano” pode estimar o intervalo pós-morte com boa precisão (24,26). No entanto, essa comunidade microbiana é altamente variável, influenciada por fatores como clima, temperatura, umidade, pH, dieta, uso prévio de antibióticos e presença de insetos necrófagos (24, 25). Mesmo assim, a caracterização das comunidades bacterianas em locais específicos como intestino, órgãos internos, cavidade oral ou solo adjacente, aliada a modelos preditivos (24) tem mostrado potencial para estimar o IPM com margens de erro reduzidas, chegando a cerca de 2 dias (16, 27).

4.2.2.  Métodos Avançados em Física e Química

Além da biologia molecular, há um predomínio de estudos que utilizam técnicas instrumentais avançadas para obter dados objetivos. Técnicas baseadas em análise de imagem microscópica, como a espectroscopia e a quimiometria, têm sido aplicadas na estimativa do intervalo pós-morte em restos esqueléticos humanos.

O estudo de Ortiz-Herrero et al. (2021) é um exemplo desse tipo de método. Ele utiliza a espectroscopia Raman combinada com a quimiometria (OPLSR) em restos esqueléticos humanos. A coleção de 53 restos esqueléticos humanos reais analisados e utilizados para construir e validar o modelo OPLS tinha um IPM conhecido que variava de 15 a 87 anos e o método analítico proposto demonstrou ser aplicável e confiável para esse intervalo de tempo, sendo capaz de determinar o IPM em 10 das 14 amostras de validação com um erro de precisão inferior a 30%, o que torna essa metodologia promissora, ainda que experimental (28).

No humor vítreo, a tanatoquímica tradicional vem sendo aprimorada por meio de plataformas analíticas que integram espectroscopia e termogravimetria associadas à quimiometria, em uma abordagem multivariada, sendo apresentada como uma alternativa nova e promissora. Segundo Risoluti et al. (2019), essa combinação tem evidenciado a relevância de elementos como fósforo (P), enxofre (S) e magnésio (Mg), além da já consolidada dosagem de potássio (K), resultando em maior acurácia e possibilitando a estimativa do intervalo pós-morte por períodos de até 15 dias (29).

A impressão digital volabolômica, baseada na análise de compostos orgânicos voláteis (VOCs), tem sido proposta como um método objetivo e promissor para a estimativa do intervalo pós-morte pelo artigo de Mazzatenta et al. (2024), mas segue em fase preliminar e experimental. Essa abordagem permite medições em tempo real e a correlação com intervalos específicos de IPM (0, 24, 48 e 72 horas), fornecendo uma “impressão digital” química complexa que atua como biomarcador característico das fases iniciais da decomposição (15).

De acordo com Wilk et al. (2021), o desenvolvimento de uma abordagem termométrica individualizada para a estimativa do intervalo pós-morte, baseada na modelagem de Dinâmica de Fluidos Térmicos combinada à termometria e à reconstrução tridimensional por fotogrametria, representa o primeiro método não invasivo e sem contato proposto para a reconstrução do IPM, permitindo aumentar a precisão da estimativa de 2 a 35 horas (30).

Em suma, as abordagens modernas são predominantes porque buscam estabelecer um método quantitativo científico baseado em critérios físicos e matemáticos, em contraste com a natureza observacional e limitada dos métodos tradicionais (1,2,9).

5. CONCLUSÃO

A revisão sistemática evidenciou uma evolução dos métodos tradicionais de estimativa do intervalo pós-morte, aqueles que se baseiam em parâmetros físicos e observacionais, para técnicas mais modernas, que utilizam análises moleculares e tecnológicas. Os estudos demonstram que essas novas abordagens tendem a oferecer maior precisão e objetividade, embora ainda existam limitações relacionadas à padronização dos protocolos e à validação em amostras humanas, além de que a maioria está ainda em fase experimental. Nenhum método único mostrou-se suficiente para determinar o IPM de forma totalmente confiável, sendo mais eficaz a combinação de diferentes técnicas. Assim, conclui-se que o avanço na área depende da integração entre métodos tradicionais e modernos, do aprimoramento dos modelos existentes e da continuidade das pesquisas para aplicação prática na medicina legal.