Artigo de revisão
USE OF microRNA's AS BIOMARKERS FOR THE IDENTIFICATION OF BIOLOGICAL FLUIDS IN FORENSIC ANALYSES
Como citar: Vieira LL, Afonso ADO, Garrido RG. USE OF microRNA's AS BIOMARKERS FOR THE IDENTIFICATION OF BIOLOGICAL FLUIDS IN FORENSIC ANALYSES. Persp Med Legal Pericia Med. Vol. 11, 2026; 260418.
https://dx.doi.org/10.47005/260418
Recebido em 21/03/2026
Aceito em 28/03/2026
The authors report no conflict of interest.
USE OF microRNA's AS BIOMARKERS FOR THE IDENTIFICATION OF BIOLOGICAL FLUIDS IN FORENSIC ANALYSES
Resumo
INTRODUÇÃO: A ciência forense, integrada às técnicas moleculares, constitui uma peça fundamental para a elucidação de crimes. Nesse contexto, a correta identificação de fluidos biológicos é essencial, pois possibilita a reconstrução da natureza e da dinâmica do delito. Entretanto, os métodos atualmente empregados apresentam limitações, sobretudo em termos de sensibilidade e especificidade. Diante desse cenário, a epigenética surge como uma alternativa promissora através do uso de microRNAs (miRNAs) para essa análise, que, além de exibirem um perfil de expressão específico para cada líquido corporal, são consideravelmente resistentes à degradação. Sendo assim, a pesquisa buscou avaliar o uso de miRNAs na identificação de fluidos biológicos. MATERIAL E MÉTODO: Foi conduzida uma revisão sistemática da literatura na base de dados PubMed, abrangendo o período de 2018 a 2025, considerando critérios de inclusão e exclusão. RESULTADOS: O estudo incluiu 12 artigos para revisão, onde foi observado que determinados miRNAs apresentaram perfil de expressão específico para cada fluido. DISCUSSÃO: MiR-888-5p e miR-891a-5p foram consistentemente apontados como biomarcadores específicos de sêmen, enquanto miR-144-3p e miR-451a foram indicativos de amostras sanguíneas. O miR-214-3p foi capaz de distinguir sangue venoso de sangue menstrual, sendo mais elevado neste último. Muitos autores relataram dificuldades na distinção entre saliva e secreção vaginal. Apesar disso, o uso dos marcadores em estratégias combinatórias potencializa o poder discriminatório. CONCLUSÃO: Logo, embora a aplicação dos miRNAs no âmbito criminal esteja em fase inicial de expansão, evidencia-se seu potencial para aprimorar a abordagem de vestígios biológicos na rotina laboratorial forense.
Palavras Chave: MicroRNAs; Biomarcadores; Líquidos corporais; Ciências Forenses.
Abstract
INTRODUCTION: Forensic science, integrated with molecular techniques, constitutes a fundamental tool for solving crimes. In this context, the correct identification of biological fluids is essential, as it enables the reconstruction of the nature and dynamics of the crime. However, methods currently employed present limitations, particularly in terms of sensitivity and specificity. In this scenario, epigenetics emerges as a promising alternative through the use of microRNAs (miRNAs) for this analysis, which not only exhibit a specific expression profile for each bodily fluid but are also considerably resistant to degradation. Therefore, this research aimed to evaluate the use of miRNAs in the identification of biological fluids. MATERIAL AND METHOD: A systematic literature review was conducted in the PubMed database, covering the period from 2018 to 2025, considering inclusion and exclusion criteria. RESULTS: The study included 12 articles for review, where it was observed that certain miRNAs presented specific expression profiles for each fluid. DISCUSSION: MiR-888-5p and miR-891a-5p were consistently identified as specific biomarkers for semen, while miR-144-3p and miR-451a were indicative of blood samples. MiR-214-3p was able to distinguish venous blood from menstrual blood, being higher in the latter. Many authors reported difficulties in distinguishing between saliva and vaginal secretion. Nevertheless, the use of these markers in combinatorial strategies enhances discriminatory power. CONCLUSION: Therefore, although the application of miRNAs in the criminal field is still in its early stages, their potential to improve the analysis of biological traces in routine forensic laboratories is evident.
Keywords (MeSH): MicroRNAs; Biomarkers; Body Fluids; Forensic Sciences.
References
1. International Association of Forensic Science (IAFS). Sydney Declaration. 23rd Triennial Meeting of the International Association of Forensic Sciences [Internet]. Sidney: IAFS; 2023 Nov [cited 2026 Mar 5]. Available from: https://metsoc2025.au/cms/cms/wp-content/uploads/IAFS-2023-Sydney-Declaration-18-May-2021.pdf.
2. Coutinho JH. Perícia criminal: uma abordagem de gestão laboral [trabalho de conclusão de curso]. Goiânia: Pontifícia Universidade Católica de Goiás; 2021. 14 p.
3. Fruehwirth M, Delai RM, Folha RA. Técnicas de biologia molecular aplicadas a perícia e ciência forense. Revista DCS. [Internet]. 2015 Feb [cited 2025 Sept 17];12(42):1-25. Available from: https://ojs.revistadcs.com/index.php/revista/article/view/2110
4. Dolinsky LC, Pereira LM. DNA forense: artigo de revisão. Saúde & Ambiente em Revista. [Internet]. 2007 Jul-Dec [cited 2025 Sept 17];2(2):11-22. Available from: https://biologia.bio.br/curso/2%C2%BA%20per%C3%ADodo%20Faciplac/Gen%C3%A9tica/DNA%20forense_artigo%20de%20revis%C3%A3o.pdf
5. Leite VS, Batista MI, Soriano EP, Carvalho MV, Sobral AP. Uso das técnicas de biologia molecular na genética forense. Derecho y Cambio Social. [Internet]. 2013 Jun [cited 2025 Sept 17];10(34):1-18. Available from: https://ojs.revistadcs.com/index.php/revista/article/view/1654
6. Cardoso AP. Técnicas de genética forense: uma revisão sobre as principais técnicas utilizadas para a obtenção de perfil de DNA na resolução de crimes e sua importância no âmbito jurídico [trabalho de conclusão de curso]. Tubarão: Ânima Educação; 2021. 33 p.
7. Glynn CL. Potential applications of microRNA profiling to forensic investigations. RNA. 2020 Jan;26(1):1-9. doi:10.1261/rna.072173.119.
8. Hegde C, Shekhar R, Paul PM, Pathak C. A review on forensic analysis of bio fluids (blood, semen, vaginal fluid, menstrual blood, urine, saliva): Spectroscopic and non-spectroscopic technique. Forensic Sci Int. 2025 Feb;367:112343. doi:10.1016/j.forsciint.2024.112343.
9. Santiago MC. Vestígios biológicos como prova pericial: sua importância e as peculiaridades de sua manipulação para a genética forense. Rev Crim Med Leg. 2022;7(1):10-20. doi:10.51147/rcml066.2022.
10. Oliveira JL. Perícia e Investigação Criminal: uma proposta de melhoria do modelo organizacional visando a otimização de resultados [dissertação]. Rio de Janeiro: Escola Brasileira de Administração Pública e de Empresas, Fundação Getúlio Vargas; 2013. 158 p.
11. Hamza M, Sankhyan D, Shukla S, Pandey P. Advances in body fluid identification: MiRNA markers as powerful tool. Int J Legal Med. 2024 Mar;138(4):1223-1232. doi:10.1007/s00414-024-03202-6.
12. Carvalho AS. Perfil de MicroRNAs: Potenciais Biomarcadores de Amostras de Sangue [dissertação]. Porto: Instituto de Ciências Biomédicas Abel Salazar, Universidade do Porto; 2020. 74 p.
13. Rocchi A, Chiti E, Maiese A, Turillazzi E, Spinetti I. MicroRNAs: An update of applications in forensic science. Diagnostics. 2020 Dec;11(1):32. doi:10.3390/diagnostics11010032.
14. Mayes C, Seashols-Williams S, Hughes-Stamm S. A capillary electrophoresis method for identifying forensically relevant body fluids using miRNAs. Leg Med. 2018 Jan;30:1-4. doi:10.1016/j.legalmed.2017.10.013.
15. Tian H, Lv M, Li Z, Peng D, Tan Y, Wang H, et al. Semen-specific miRNAs: Suitable for the distinction of infertile semen in the body fluid identification? Forensic Sci Int Genet. 2018 Mar;33:161-167. doi:10.1016/j.fsigen.2017.12.010.
16. O’Leary KR, Glynn CL. Investigating the isolation and amplification of microRNAs for forensic body fluid identification. MicroRNA. 2018 Apr;7(3):187-194. doi:10.2174/2211536607666180430153821.
17. Dørum G, Ingold S, Hanson EK, Ballantyne J, Russo G, Aluri S, et al. Predicting the origin of stains from whole miRNome massively parallel sequencing data. Forensic Sci Int Genet. 2019 May;40:131-139. doi:10.1016/j.fsigen.2019.02.015.
18. Fujimoto S, Manabe S, Morimoto C, Ozeki M, Hamano Y, Hirai E, et al. Distinct spectrum of microRNA expression in forensically relevant body fluids and probabilistic discriminant approach. Sci Rep. 2019 Oct;9:14332. doi:10.1038/s41598-019-50796-8.
19. He H, Ji A, Zhao Y, Han N, Hu S, Kong Q, et al. A stepwise strategy to distinguish menstrual blood from peripheral blood by Fisher’s discriminant function. Int J Legal Med. 2020 May;134(3):845-851. doi:10.1007/s00414-019-02196-w.
20. Liu Y, He H, Xiao Z-X, Ji A, Ye J, Sun Q, et al. A systematic analysis of miRNA markers and classification algorithms for forensic body fluid identification. Brief Bioinform. 2021 Jul;22(4):bbaa324. doi:10.1093/bib/bbaa324.
21. Li Z, Lv M, Peng D, Xiao X, Fang Z, Wang Q, et al. Feasibility of using probabilistic methods to analyse microRNA quantitative data in forensically relevant body fluids: a proof-of-principle study. Int J Legal Med. 2021 Nov;135(6):2247-2261. doi:10.1007/s00414-021-02678-w.
22. Chen H, Hu S, Yang R, Hu S, Yao Q, Zhao Y, et al. The screening and validation process of miR-223-3p for saliva identification. Leg Med. 2023 Nov;65:e102312. doi:10.1016/j.legalmed.2023.102312.
23. Altmeyer L, Baumer K, Hall D. Differentiation of five forensically relevant body fluids using a small set of microRNA markers. Electrophoresis. 2024 Oct;45(19–20):1785-1795. doi:10.1002/elps.202400089.
24. Alsaeed SA, Elrewieny NM, Eltokhy RA, Mohamed MS, Khalil WK, Shalby AB, et al. Analysis of MiR-20b, MIR-197 markers for differentiation between forensic body fluids encountered in sexual assault cases. Forensic Sci Med Pathol. 2024 Jun;21(1):56-62. doi:10.1007/s12024-024-00831-6.
25. Li S, Liu J, Xu W, Zhang S, Zhao M, Miao L, et al. A multi-class support vector machine classification model based on 14 microRNAs for forensic body fluid identification. Forensic Sci Int Genet. 2025 Feb;75:103180. doi:10.1016/j.fsigen.2024.103180.
26. Hanson EK, Lubenow H, Ballantyne J. Identification of forensically relevant body fluids using a panel of differentially expressed microRNAs. Anal Biochem. 2009 Apr;387(2):303-314. doi:10.1016/j.ab.2009.01.037.
27. Zubakov D, Boersma AW, Choi Y, Kuijk PF, Wiemer EA, Kayser M. MicroRNA markers for forensic body fluid identification obtained from microarray screening and quantitative RT-PCR confirmation. Int J Legal Med. 2010 May;124(3):217-226. doi:10.1007/s00414-009-0402-3.
28. Prado CC, Reis MF. Vestígios biológicos e técnicas moleculares aplicadas na investigação criminal [Internet]. Biblioteca Digital do SUSP; 2018 [cited 2025 Nov 6]. Available from: http://dspace.mj.gov.br/handle/1/4918
29. Virkler K, Lednev IK. Analysis of body fluids for forensic purposes: from laboratory testing to non-destructive rapid confirmatory identification at a crime scene. Forensic Sci Int. 2009 Jul;188(1–3):1-17. doi:10.1016/j.forsciint.2009.02.013.
30. Praihirunkit P. miRNAs: perspective towards the use for body fluid identification. Siriraj Med J. 2020 Aug;72(6):512-526. doi:10.33192/Smj.2020.70.
31. Gerra MC, Dallabona C, Cecchi R. Epigenetic analyses in forensic medicine: future and challenges. Int J Legal Med. 2024 Jan;138(3):701-719. doi:10.1007/s00414-024-03165-8.
32. Silva SS, Lopes C, Teixeira AL, Carneiro MJ, Medeiros R. Forensic miRNA: Potential biomarker for body fluids? Forensic Sci Int Genet. 2015 Jan;14:1-10. doi:10.1016/j.fsigen.2014.09.002.
33. Lynch C, Fleming R. RNA based approaches for body fluid identification in forensic science. WIREs Forensic Sci. 2021 Sep;3(4):e1407. doi:10.1002/wfs2.1407.
34. Xu D, Di K, Fan B, Wu J, Gu X, Sun Y, et al. MicroRNAs in extracellular vesicles: sorting mechanisms, diagnostic value, isolation, and detection technology. Front Bioeng Biotechnol. 2022 Oct;10:948959. doi:10.3389/fbioe.2022.948959.







